免离心流程–可选磁珠吸附获得上清,避免手工离心去沉淀步骤
高产量–获得高达200μg的质粒DNA
快速–从收集细菌开始,可在70分钟内处理24个样品,无需人工干预
通用型强—可适用于50mL不同菌液和质粒
转染级别–可获得<0.1 EU/μg的无内毒素质粒DNA
高纯提取–产物无污染,A260/A280>1.8、A260/A230>2.0
磁珠法无内毒素质粒中量提取试剂盒可用于提供内毒素水平为<0.1 EU/μg的高质量质粒DNA,下游产物可直接应用于真核转染和其他对内毒素水平敏感的体外应用。
该试剂盒采用基于磁珠的技术,可在≤50mL LB或≤10mL TB菌液,或其他合适的生长培养基中纯化质粒DNA。磁珠法无内毒素质粒中量提取试剂盒可在大多数开放式全自动移液平台和基于磁珠法的核酸提取仪上实现自动化提取。产量可因质粒的拷贝数、使用的大肠杆菌菌株、培养基和生长条件而异。
磁珠法无内毒素质粒中量提取试剂盒采用改良的碱裂解方法先制备出样品裂解液。然后使用磁珠Mag-Bind® Particles LC(可按需求另购)或Lysate Clearance Filter Syringe(可按需求另购)或离心分离沉淀物。新型超顺磁性磁珠Mag-Bind®Particles LC会与细胞碎片发生结合,利用磁性吸附将沉淀带出。即可实现无离心方案,使其更适用于高通量、自动化的工作流程。
制备出裂解上清后,质粒DNA通过特殊配制的结合缓冲液与Mag-Bind®磁珠结合,然后经过洗涤程序去除内毒素、盐和其他污染物。最后使用无内毒素水洗脱高质量的质粒DNA,产物即可应用于广泛的下游应用,如转染、常规筛选、限制性内切酶消化、转化、PCR和DNA测序等。
应用:转染、常规筛选、限制性内切酶消化、转化、PCR、DNA测序、体外转录和其他需要纯净DNA的应用
样本:LB≤50mL菌液或TB≤10mL菌液
处理时间:70min完成1-24个样本
结合能力:200ug
洗脱体积:100ul
1. Q公司对比,得率更高,操作更方便

按照说明书操作步骤,使用磁珠法无内毒素质粒中型试剂盒以及竞品公司的试剂盒,从DH5α培养基(n=3)中提取不同类型和大小的质粒。使用Thermo Scientific 的NanoDrop™ 2000c分光光度计对提取的质粒DNA进行测定。所有质粒产量均具有可比性,上图显示Omega Bio-tek试剂盒优于竞品公司试剂盒。
2. 与T公司相比,转染效率更高

从5mL DH5α培养基(n=3)制备质粒pGL4.51,并使用MagBinder® Fit24核酸提取仪上的磁珠法质粒中量提取试剂盒与竞品公司的等效试剂盒进行提取。使用2μL Lipofectamine转染试剂,将200ng提取好的质粒转染到10,000个细胞中。使用Omega Bio-tek试剂盒提取的质粒生物发光信号更高,与竞品公司相比,转染效率更高。
3. 与T公司相比,质粒产量显著提高

在MagBinder® Fit24核酸提取仪上,使用磁珠法无内毒素质粒中量提取试剂盒以及竞品公司试剂盒,按照说明书操作步骤,从5mL DH5α培养基(n=3)中纯化pGEM和pGL4.51质粒。使用Thermo Scientific 的NanoDrop™ 2000c分光光度计对纯化的质粒DNA进行测定。Omega Bio-tek试剂盒的质粒纯化不仅不含内毒素(<0.1 EU/μg),而且与竞品公司的试剂盒相比,产量也显著更高。
4. 适用于各种质粒类型和培养基

磁珠法无内毒素质粒中量提取试剂盒可处理各种样品初始条件,如不同质粒类型、分子量、培养基以及初始培养体积。质粒产量可能因条件不同而存在差异。