免离心流程–可选磁珠吸附获得上清,避免手工离心去沉淀步骤
高产量–可从≤1.5mL TB培养基中获得高达20μg的质粒DNA
通用型强–可适用于不同类型的培养基,如LB/TB等
转染级别–可获得<0.1 EU/μg的无内毒素质粒DNA
高纯提取–产物无污染,A260/A280>1.8、A260/A230>2.0
磁珠法无内毒素质粒小量提取试剂盒可用于提供内毒素水平为<0.1 EU/μg的高质量质粒DNA,下游产物可直接应用于真核转染和其他对内毒素水平敏感的体外应用。
该试剂盒基于磁珠的技术,可在≤1.5mL LB或TB或其他合适的生长培养基中纯化质粒DNA。磁珠法无内毒素质粒小量提取试剂盒可在大多数开放式全自动移液平台和基于磁珠法的核酸提取仪上实现自动化提取。纯化的质粒DNA内毒素含量可达<0.1 EU/μg,产量可因质粒的拷贝数、使用的大肠杆菌菌株、培养基和生长条件而异。
磁珠法无内毒素质粒小量提取试剂盒采用改良的碱裂解法先制备出样品裂解液,然后使用磁珠Mag-Bind®Particles LC(可按需求另购)或通过离心分离沉淀物。新型超顺磁性磁珠Mag-Bind®Particles LC会与细胞碎片发生结合,利用磁性吸附将沉淀带出,即可实现无离心方案,使其更适用于高通量、自动化的工作流程。
应用:转染、常规筛选、限制性内切酶消化、转化、PCR、DNA测序、体外转录和其他需要纯净DNA的应用
样本:96孔深孔板每孔≤1.5mL过夜菌液
处理时间:95min完成1-96个样本
结合能力:20ug
洗脱体积:50-100ul
1. 在各种质粒类型和培养基中均可高效提取

按照说明书操作步骤,使用磁珠法无内毒素质粒小量提取试剂盒以及竞品公司试剂盒,从1.5mL DH5α培养基(n=3)中提取pGEM质粒DNA。使用Thermo Scientific的NanoDropTM 2000c分光光度计对提取的质粒DNA进行测定。Omega Bio-tek试剂盒提取的质粒内毒素(<0.1 EU/μg)水平更低,产量也高于竞品公司。
2.与P公司相比,转染效率更高

从1.5mL DH5α培养基(n=3)制备pGEM质粒,并使用磁珠法无内毒素质粒小量提取试剂盒以及竞品公司的等效试剂盒进行提取。使用2μL Lipofectamine转染试剂,将200ng纯化好的质粒转染到10,000个细胞中。使用Omega Bio-tek试剂盒纯化的质粒产生更高的生物发光信号,与竞品公司相比转染效率更高。
3.在Hamilton Microlab®Star™上实现自动化质粒提取,产量和纯度一致

使用磁珠法无内毒素质粒小量提取试剂盒试剂盒从1mL DH5α培养基中提取pGEM质粒,使用Hamilton Microlab® STAR™平台进行全自动提取,并使用Mag-Bind® Particles LC吸附去除沉淀,用100μL洗脱获得质粒DNA。使用Thermo Scientific的NanoDrop™ 2000c分光光度计进行测定,质粒的产量重复性高且A260/A280≥1.8,A260/A2300≥2.0。
4.在各种质粒类型和培养基中均可高效提取

磁珠法无内毒素质粒小量提取试剂盒可处理各种样品的初始条件,如不同质粒类型、分子量、培养基以及初始培养体积。质粒产量可能因条件不同而存在差异。